紫外可见分光光度计的校准主要是通过对一些有数值型的技术指标测试来进行。如波长准确度、波长重复性、光谱带宽、杂散光、分辨率、透射比误差、透射比重复性、噪声、基线平直性等，这里主要介绍波长准确度和波长重复佳、透射比准确度和透射比重复性两个项目校准的具体仪器条件或校准步骤。

　　①波长准确度和波长重复性  若仪器能够放置低压汞灯的，按照检定规程低压汞灯进行全波长测试，否则可用仪器固有的氘灼测试，取单束光能量方式，扫描速度15nm/min，响应快，小带宽0.1nm，量程0～99%，对486. 02nm和656. 10nm两个单峰进行单方向重复扫描3次，测量出谱图上的2条谱线波长，波长测量的平均值与波长的标准值之差就是波长准确度，测量波长的大值与小值之差就是波长重复性。

　　②透射比准确度和透射比重复性  取带宽2nm，用1套标准石英吸收池分别装空白溶液和质量分数为0．006000%的重铬酸钾标准溶液，在35nm，257nm,313nm，350nm四个波长处连续3次测量透射比，与检定规程中附带的标准值进行比较，测量平均值与标准值之差就是透射比准确度，测量值的大值与小值之差就是透射比重复性。

　　影响紫外可见分光光度计光度准确度的主要因素有以下几个方面：

　　①仪器的杂散光。

　　②仪器的光度噪声。

　　③仪器的基线平直度。

　　④仪器的光谱带宽。不同的光谱带宽分析误差不同；不同试样有不同的*分析测试光谱带宽。

　　⑤波长准确度。对同一物质，不同的波长有不同的摩尔吸光系数，即不同的灵敏度。

　　⑥试样的来源，包括样品的制备和取样的方法（如称量、容量、溶剂、试剂、pH值、时间、温度等）。

　　⑦比色皿的性能，包括比色皿的加工误差、比色皿的配对、比色皿的玷污等。

　　由此可知，光度准确度是一个综合性的性能技术指标。要使用紫外可见分光光度计测得准确可靠的数据，必须注意上述几个方面的影响。特别是在分析测试时，如何选择（或设定）这些技术指标是非常重要的。应该指出的是，紫外可见分光光度计在同时给出吸光度误差和透射比误差时，两者不能相互矛盾。